1983年KaryMullis发明PCR技术以来,PCR实验历经了“三级跳跃式”的发展历程。
从最早期的手工操作PCR反应,到半自动机械臂在水浴中操作PCR反应,再到目前已经非常成熟的半导体(Peltier)温控技术,PCR设备对操作人员来说已经变得越来越友好,越来越便利。
早期的PCR条件优化只能一次又一次地不停尝试各种实验条件的组合,直到90年代中期Eppendorf在5331系列PCR上实现了不同列之间不同温度的功能,一次实验就能够测试12个不同的条件,一下子将PCR实验条件优化的效率提高了10倍以上,这也是我们所熟知的PCR梯度功能。
PCR仪作为一个成熟的设备,是否还有发展的空间呢?
答案是肯定的,Eppendorf在最新的Mastercycler®X50系列PCR仪上引入了创新的2D梯度功能。
世界著名的MPICBG(MaxPlanckInstituteofMolecularCellBiologyandGenetics)的科学家,在使用了EppendorfMastercycler®X50的2D梯度功能后表示,使用2D梯度可以非常方便地在一次实验中对PCR反应过程中的两个温度步骤进行优化(如,变性与退火),一次可以摸索96个不同的温度条件组合。
这样的条件优化对于难以扩增的高GC含量的模板的条件优化显得尤为重要。
而这使得PCR条件优化的过程有了全新的可能性。